凝膠成像儀的樣本前處理要做好哪些呢？

　　凝膠成像儀在分子生物學(xué)等諸多領(lǐng)域有著廣泛應(yīng)用，能清晰地呈現(xiàn)凝膠電泳后的條帶等情況，而要想獲得高質(zhì)量、準(zhǔn)確可靠的成像結(jié)果，做好樣本前處理工作至關(guān)重要，以下是要重點(diǎn)關(guān)注的幾個方面：

　　1.凝膠制備

　　要依據(jù)檢測目的和樣本特性來選擇合適的凝膠類型，常見的有瓊脂糖凝膠和聚丙烯酰胺凝膠等。如果是對DNA進(jìn)行分離檢測，瓊脂糖凝膠通常是不錯的選擇，其制備時需要準(zhǔn)確稱量瓊脂糖粉末，按照合適的比例加入到緩沖液中，然后加熱使其充分溶解，待冷卻至適宜溫度后倒入制膠模具中，要確保凝膠均勻平整，避免出現(xiàn)氣泡、裂縫等情況，因?yàn)檫@些瑕疵可能會干擾后續(xù)成像時對條帶的觀察和分析。對于聚丙烯酰胺凝膠，其配制過程更為精細(xì)復(fù)雜，要嚴(yán)格把控各試劑的用量、混合順序以及聚合反應(yīng)的條件，保證凝膠的質(zhì)量符合要求，為樣本的分離和成像奠定良好基礎(chǔ)。

　　2.樣本加載

　　樣本加載同樣關(guān)鍵，在吸取待檢測樣本時，要使用合適的移液器，確保吸取的體積準(zhǔn)確無誤，避免因加樣量過多或過少影響成像效果。比如在進(jìn)行DNA電泳時，加樣量過多可能導(dǎo)致條帶過寬、模糊，甚至出現(xiàn)拖尾現(xiàn)象；加樣量過少則條帶可能太淡，不易觀察清楚。同時，加樣時要小心操作，將樣本緩慢、準(zhǔn)確地加到凝膠的加樣孔中，防止樣本溢出到相鄰孔或者凝膠表面，破壞樣本的分布秩序，影響后續(xù)條帶的清晰呈現(xiàn)。

　　3.電泳條件設(shè)定

　　電泳過程是實(shí)現(xiàn)樣本在凝膠中有效分離的重要步驟，需要合理設(shè)定電泳條件。要根據(jù)樣本的大小、電荷等性質(zhì)來確定合適的電壓、電流以及電泳時間。電壓過高可能使樣本在凝膠中遷移速度過快，導(dǎo)致條帶分離不清晰，出現(xiàn)彌散現(xiàn)象；電壓過低則樣本遷移過慢，會延長實(shí)驗(yàn)時間，甚至無法達(dá)到理想的分離效果。而且電泳時間也需精準(zhǔn)把控，過長或過短都不利于樣本的準(zhǔn)確分離，進(jìn)而影響最終凝膠成像儀上呈現(xiàn)的圖像質(zhì)量。

　　4.凝膠染色與脫色

　　為了讓樣本條帶能夠在凝膠成像儀下清晰可見，往往需要對凝膠進(jìn)行染色與脫色處理。像對DNA凝膠常用的溴化乙錠染色法，要按照規(guī)定的濃度和時間進(jìn)行染色操作，之后進(jìn)行充分的脫色，去除多余的染色劑，使條帶的顏色對比更鮮明，背景更干凈，便于凝膠成像儀準(zhǔn)確捕捉和清晰呈現(xiàn)樣本的電泳結(jié)果，幫助研究人員更好地進(jìn)行后續(xù)的分析與判斷。